전체 글15 크로마토그래피란? 이론, 원리 그리고 종류와 방법 크로마토그래피는 생화학 및 기타 생명공학 연구에서 중요하게 사용되는 실험방법이다. 크로마토그래피가 무엇인지 이해학고, 여러 가지 chromatography의 종류와 각 분배법의 원리, 방법에 대해 알아보려 한다. 크로마토그래피란? 이론과 원리 크로마토그래피(chromatography)는 혼합물의 성분들을 분리, 동정하는 가장 효과적인 기술이다. 화학, 생화학, 의약품 등 다양한 분야에서 목표 물질을 분리하여 그 특성과 기능을 규명하는 것이 중요하다. Chromatography는 기본적으로 시료 물질이 이동상과(mobile phase) 정지상(stationary phase)에 놓여, 그 물리적 차이로 인해 구별되는 원리를 이용한다. 이동상은 물질이 이동하도록 하는 추진력(driving force)을 주며,.. 2023. 3. 4. 세포 파쇄의 이론, 종류와 방법 박테리아와 동물, 식물은 모두 세포막의 구조가 각각 다릅니다. 때문에 어떤 생물체 세포를 파쇄하는지에 따라 적절한 파쇄 방법을 선택할 수 있어야 합니다. 이번 포스트에서는 다양한 세포 파쇄법의 종류와 그 방법에 대해 알아보도록 하겠습니다. 세포 파쇄의 이론 이전 글들에서 DNA를 가공하는 방법과, 형질 전환, 그리고 특정 단백질을 과발현 하는 방법 등을 살펴보았는데, 이렇게 cloning부터 expression 과정을 거친 뒤 최종적으로 그 단백질을 얻으려면 세포를 파쇄(lysis)해서 단백질을 밖으로 꺼내는 과정이 필요합니다. 포스팅되었던 글들에서는 주로 박테리아를 다루는 내용이었지만, 연구하는 목적 단백질을 발현하는 생물체 대상이 동/식물일 수도 있습니다. 또한, 생물체로부터 얻고자 하는 물질이 단백.. 2023. 3. 3. 젖당 오페론과 Lac Z - IPTG 단백질 과발현 젖당(lactose)은 E.coli의 에너지원 중 하나이다. 미생물이 lactose를 에너지로 사용하기 위해서는 lactose를 분해해야 하는데, 이 과정에 여러 가지 효소들이 작용한다. 이 효소들은 E.coli에서 하나의 조절시스템으로 발현이 조절된다. 이렇게 하나의 조절시스템에 의해 발현 제어를 받는 유전자 군을 오페론(Operon)이라고 한다. 젖당 오페론과 Lac Z 오페론은 프로모터(Promoter), 작동유전자(Operator), 구조유전자(Coding gene) 순으로 구성되어 있다. Lac operon은 젖당의 분해에 관여하는 3개의 구조유전자 Lac Z, LacY, Lac A의 발현을 조절하는 시스템이다. 이 중, Lac Z는 β-galactosidase라는 효소를 합성하는 유전자로 이 .. 2023. 3. 3. 형질전환이란? competent cell, 원리, 방법 1928년, 독성을 나타내지 않는 폐렴구균과 열처리로 활성을 잃은 독성 폐렴구균을 혼합 시 독성을 나타내는 현상이 발견되었다. 이후 박테리아의 내부로 DNA가 유입되어 '형질전환'이 일어난다는 사실이 밝혀졌다. 앞서 살펴본 DNA 가공 과정 후, 이를 발현시키기 위해 Transformation 과정을 거친다. 형질전환이란? 형질전환(Transformation)의 고전적 의미는 '외부 DNA가 bacteria 내부로 유입되어 발현됨으로써 박테리아의 형질을 변화시키는 현상'이다. 박테리아는 자연적으로 외래 DNA를 유입할 수 있다. 박테리아가 외부 DNA를 세포 내로 유입시킬 수 있는 능력은 분자 생물학의 기반이 되는 기술로서 활용된다. 자연계에서 관찰 가능한 박테리아의 자체적인 transforamtion .. 2023. 3. 2. 이전 1 2 3 4 다음
