전체 글15 HPLC - 이론과 종류, 정량 분석 방법 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)는 감도가 좋으며 정확한 분석이 가능하다. 자동화가 되어있어 여러 혼합물들을 분리, 정제가 용이하고 분리된 물질의 분석까지도 가능하다. HPLC의 원리와 기기 명칭, 기능 등에 대해 간단하게 살펴보려 한다. HPLC의 이론 HPLC는 고성능 액체 크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography) 또는 고압 액체 크로마토그래피(High Pressure Liquid Chromatography)라고 한다. 액체 크로마토그래피 기법으로, 혼합된 시료가 컬럼 내부에서 액체 이동상과 고체 정지상 사이를 흐르면서 단일 물질로 각각 분리된다. 액체 크로마토그래피의 경우 이동상의 속도가 늦어 긴 분석시간과 다양한 컬럼으로 인해 일관적이지 않은 결과를.. 2023. 3. 6. 친화 크로마토그래피란? His-tag 및 기타 태그 앞선 3개 글에서 크로마토그래피가 무엇인지와 몇 가지 크로마토그래피의 종류에 대해 다루었다. 여러 물질이 혼합된 시료에서 목적 물질만을 분리해 내는 것은 상당히 중요하다. 특이적 결합으로 높은 분리능을 갖는 방법 중 하나인 친화 크로마토그래피를 알아보자. 친화 크로마토그래피란? 이온 교환이나 젤 거름 크로마토그래피 등 여러 가지 크로마토 그래피 방법들은 알짜 전하의 크기나 질량 등의 특성을 이용하여 시료 물질을 분리할 수 있으나, 명확하게 원하는 목적 단백질만을 분리할 수는 없다. 친화 크로마토그래피 (Affiinity chromatography)의 가장 큰 특징은 원하는 목적 단백질에만 작용하는 특이적인 결합을 사용하여 분리한다는 것이다. 이러한 결합에 항원-항체의 결합, 효소-기질의 결합, 수용체-리.. 2023. 3. 5. 젤 거름 크로마토그래피의 원리, Gel bead와 틈새 부피 Gel filtration chromatography는 size exclusion chromatography 또는 molecular sieve chromatography, gel permeastion chromatography 등 여러 명칭으로 불린다. 젤 거름 크로마토그래피의 원리와 이를 통한 단백질의 분리 방법에 대해 알아보려 한다. 젤 거름 크로마토그래피의 원리 젤 거름 크로마토그래피 (gel filtration chromatography)는 물질의 크기 차이에 의해 분리하는 방법입니다. 주로 단백질이나 핵산 증의 생체 고분자 화합물을 분리하는 데에 사용된다. 일정한 크기의 많은 구멍(pore)을 가진 gel bead를 정지상으로 사용하는데, gel bead를 컬럼에 충전(packing)한 뒤 시료.. 2023. 3. 5. 이온 교환 크로마토그래피 - 이론, 교환체, 주의사항 이전 글에서 크로마토그래피에 대해 간단하게 알아보았습니다. 이번 포스팅에서는 흡착 크로마토그래피의 한 종류인 '이온 교환 크로마토그래피'의 원리를 이해하고, 이를 이용한 물질의 분리 방법에 대해 다뤄보도록 하겠습니다. 이온 교환 크로마토그래피 이온 교환(Ion-exchange) 크로마토그래피는 이온 교환체와 이온성을 띠는 시료 사이의 가역적인 전기적 상호작용(electrostatic interaction)을 이용하는 흡착 크로마토그래피의 일종입니다. 이온 교환체(Ion-exchanger)는 전하를 띠는 functional froup을 가진 고체 지지체(support)입니다. 이온 교환 크로마토 그래피는 교환체를 컬럼(columm)에 충전하여 수행하며, 이온 교환체는 완충 용액 내에 존재하는 반대 이온과 .. 2023. 3. 4. 이전 1 2 3 4 다음
